在分析化學領域，液相色譜是應用最為廣泛的一種分離方法。其原理是將樣品溶液與固定于填充床上的流動相進行相對運動，在移動床中各組分的分配比由流動相的種類和流速決定，從而實現混合物中各種組分的高效分離。一般選擇液相色譜柱的原則是，分析大分子量化合物選擇大孔徑色譜柱；對于高pH值或者堿性化合物需要選擇高封端或者特殊封端的色譜柱，以改善峰形，延長色譜柱使用壽命等。
01
(資料圖)
色譜方法的分類
液相色譜分離方法大致可以分為正相色譜、反相色譜、離子交換色譜、疏水作用色譜、體積排除色譜、親和色譜以及手性色譜。在高效液相色譜法中，目前應用得最廣泛的是正相色譜和反相色譜，其中反相色譜又是重中之中。
02
色譜分離基本原理
正相色譜的分離原理
根據溶質極性的不同而產生的溶質在吸附劑上吸附性強弱的差異而分離。
反相色譜的分離原理
根據因溶質疏水性的不同而產生的溶質在流動相與固定相之間分配系數的差異而分離。
范德姆特方程
范德姆特方程（Van Deemter equation）在色譜學中是綜合考慮了分離過程中引起峰展寬的物理因素、動力學因素和熱力學因素后得到的單位柱長的總峰展寬與流動相流速的關系式。
03
液相色譜柱的結構
液相色譜柱由柱管、壓帽、卡套（密封環）、篩板（濾片）、接頭、螺絲（封頭）與柱填料等組成。
柱管
多用不銹鋼制成，如果使用時柱壓不高于70kg/cm2時，也可采用厚壁玻璃或石英管，管內壁要求有很高的光潔度。用于柱填料的裝填。空柱各組件均為不銹鋼材質，能耐受一般的溶劑作用。但由于含氯化物的溶劑對其有一定的腐蝕性，故使用時要注意，柱及連接管內不能長時間存留此類溶劑，以避免腐蝕。
壓帽
即色譜柱兩端套合于柱管端外壁的塑性圓柱帽，中部有小孔，多為聚四氟乙烯制成，用于固定篩板。
密封環
位于接頭螺旋環內壁的彈性環，多為聚四氟乙烯制成，用于色譜柱兩端壓帽與柱外壁的密封。
04
液相色譜柱規格
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類
1
常規分析柱（常量柱），內徑2~5mm,柱長10~30cm
2
窄徑柱（narrowbore），內徑1~2mm，柱長10~20cm
3
毛細管柱（又稱微柱microcolumn），內徑0.2~0.5mm
4
半制備柱，內徑＞5mm
5
實驗室制備柱，內徑20~40mm，柱長10~30cm
6
生產制備柱內徑可達幾十厘米
05
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